
仪器名称:动态细胞荧光成像定量分析系统
生产厂家:美国PTI公司;日本尼康公司(显微镜)等
产品型号:PTI RatioMaster
仪器编号:20080752
主要性能参数:
采样速度 | 100点/秒~1000点/秒 |
激发波长范围 | 330-650nm |
检测波长范围 | 330-650nm |
波长分辨率 | 1nm |
波长带宽 | 1-24nm |
波长切换速度 | 小于2ms |
精度 | +3/-1nm |
油镜镜头 | 40×,数值孔径1.3 |
主要应用范围:
在实验中采用Fura-2,Indo-1,MgFura,BCECF 等荧光探针,可对活细胞内钙、镁、钠离子和PH 值进行测量,分析细胞的离子瞬态过程,研究细胞的动态生理变化。
样品处理要求:
将培养18-24h,已经贴壁于圆形玻璃片上的细胞(状态良好,贴壁牢固)拿来即可。
使用注意事项:
1.一定要按顺序打开电源,稳压器——高压荧光——插座——高速可调单色器——显微镜,即在打开其他部件之前要先打开高压荧光电源。实验结束反向顺序关闭电源,即在关闭其他部件之后再关闭高压荧光电源,然后关闭稳压器。
2.测定之前,需关闭所有照明设备。
3.实验结束后要擦净超级荧光型油镜镜头上的油,以防损坏镜头。
4.实验结束后,要将PMT调至view的位置。
5.请自备实验所需试剂,溶液和耗材。
6.预约后请联系管理员告知其使用时间,请尽量选择上班时间,首次使用请仔细阅读操作流程和需自备物品,有疑问可联系管理员。
7.检测每碟细胞操作约需1小时(因实验内容不同而不同),故请预约足够时间,并提前来上机,勿超时占用他人时间。
8.请自带U盘,但勿直接拷取数据,需用专用U盘将数据拷到其他电脑后再用自带U盘拷取数据,数据拷出后专用U盘请及时格式化。
9.请严格按照操作流程操作,使用完毕请做好登记,并整理好仪器和台面,丢掉垃圾。若实验过程有何问题请及时联系管理员。
常见问题:
1.灌流液突然不滴,实验前应充分洗净灌流管并排净管内空气。
2.曲线不平滑,波动大,可能是吸管位置放置不妥当或者抽吸速度不适,应调整好吸管位置,不要让其与灌流管靠的太近,其尽量让其连续的抽吸。
3.基础荧光值太低,可能是细胞数量太少,可以通过调节光圈使激发光增强来调节。
4.孵育时液体渗漏,可能是凡士林涂抹太薄,可以使塑料圈底部的凡士林尽量厚一点。
须自备的试剂及耗材:
1.培养细胞用的圆形盖玻片(24×24mm,0.13-0.17mm thick)。
2.检测所需离子的对应染料及实验所需溶液(如台氏液),具体所需染料和溶液请查询文献。
3.枪头(1mL,200uL和10uL)